基質(zhì)金屬蛋白酶(mmp2/9)試劑盒的操作注意事項(xiàng)是什么？

更新時(shí)間：2021-12-26

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　　基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)是鋅鈣依賴性蛋白水解酶家族成員,可分解細(xì)胞外基質(zhì)(ECM),在不同的亞細(xì)胞環(huán)境中,參與多種分子的加工過程。MMPs在眾多生理學(xué)進(jìn)程中發(fā)揮重要功能,例如胚胎發(fā)育、形態(tài)發(fā)生、繁殖以及組織重構(gòu)。也參與以及自身免疫疾病,例如、和。新合成的MMPs的量主要在轉(zhuǎn)錄水平被調(diào)節(jié),已經(jīng)存在的MMPs的蛋白水解活性,不僅受控于酶原的活性,也受控于內(nèi)源性抑制劑對(duì)酶活性的抑制,例如α2-巨球蛋白,以及金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMPs)。

　　基質(zhì)金屬蛋白酶(mmp2/9)試劑盒以HRP標(biāo)記的鏈霉親和素復(fù)合物(HRPStreptavidinConjugate,HRP-SA)為基礎(chǔ),可用于檢測(cè)細(xì)胞、組織內(nèi)的特異性抗原。該試劑盒具有靈敏度高、特異性強(qiáng)、定性定位準(zhǔn)確、背景清晰。在所用的一抗與相應(yīng)靶抗原結(jié)合后,用生物化二抗與一抗特異性結(jié)合,加入HRP-SA,形成抗原—特異一抗—生物素化二抗—HRP-SA復(fù)合物,顯微鏡下觀察成像。

　　基質(zhì)金屬蛋白酶(mmp2/9)試劑盒的操作注意事項(xiàng)：

　　1.試劑盒的操作方法同WB是一樣的

　　2.試劑盒的陽(yáng)性對(duì)照，是選用全血做對(duì)照，具體如下操作如下：

　　陽(yáng)性對(duì)照（可選步驟）：可取人、小鼠、大鼠或兔100μl全血與100μl2×SDS-PAGEnon-reducingbuffer等體積混合，取5-15μl上樣。

　　3.在操作孵育的時(shí)候，建議孵育5小時(shí)

　　4.本試劑盒可以檢測(cè)MMP2/9活性，同時(shí)可以測(cè)定PROMMP2/9，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，選取觀察。

　　5.本試劑盒上樣蛋白建議20ug。

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